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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)*:小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化2(ACE2)免疫試劑盒*直銷
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化(ACE)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠血管緊張素原(aGT)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時(shí)間:2025-02-16
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:346
詳細(xì)介紹在線留言
品牌其他品牌貨號(hào)GOY-01X1353
規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1353

商品介紹:

名稱    大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞   

2.組織來源:臍帶組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),臍帶中通過尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管,與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-R232

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 CNPY2 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

 CALR / Calreticulin 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

 CALR / Calreticulin 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

 CALU / Calumenin 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

 ROBO2 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

食蟹猴 IL1R2 / IL1RB 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

食蟹猴 EDAR 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

食蟹猴 IGFBP3 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Bacillus thuringiensisBMP結(jié)合內(nèi)皮調(diào)節(jié)因子檢測(cè)試劑盒

Bacillus thuringiensis磷脂C檢測(cè)試劑盒

Bacillus thuringiensisCC趨化因子配體24檢測(cè)試劑盒

Bacillus thuringiensis雙皮質(zhì)檢測(cè)試劑盒

Bacillus thuringiensis核糖核酸H檢測(cè)試劑盒

Bacillus thuringiensis早期生長反應(yīng)蛋白2檢測(cè)試劑盒

Bacillus thuringiensis甲基胞嘧雙加氧3檢測(cè)試劑盒

Bacillus thuringiensis甲基胞嘧雙加氧1檢測(cè)試劑盒

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